PRACTICA DE HIERRO

HIERRO

MATERIAL:
Espectrofotometro
Cubetas
Rotulador de vidrio
Tubos de plástico
Pipeta graduada de 1 ml
Pipeta automatica de 200 ul
Vaso de precipitado para residuos
Papel de fieltro
REACTIVOS:
R1 Tampon (acetato pH 4.9 100mmol/L)
R2 Reductor(ácido ascorbico 99.7%)
R3 Color (ferroZine 40mmol/L)
IRON CAL(patrón primario acuoso de hierro 100ug/dl)
MUESTRA:
Sangre venosa
FUNDAMENTO:

• El hierro férrico presente en la muestra y unido a la transferrina es liberado por la acción guanidino
• El hierro ferrico libre es reduciod a ferroso por la hidroxilamina
• El hierro ferroso reacciona con la ferrozina para producir un complejo coloreado

DESARROLLO:
Lo primero de todo hacemos el reactivo de trabajo disolviendo el contenido de tubo R2(reductor) en un frasco de R1(Tampon), a continuación los tapamos y lo mezclamos
1.Cogemos cuatro tubos de ensayo
2.Rotulamos los tubos de ensayo (blanco RT , patrón , blanco muestra , muestra)
3.En el tubo blanco RT añadimos :1 ml de reactivo de trabajo , 1 gota de R3 y 200 ml de agua destilada
4.En el tubo patrón añadimos:1 ml de reactivo , 1 gota de R3 y 200 ul de patrón
5.En el tubo blanco muestra añadimos: 1 ml de reactivo , y 200 ul de muestra
6.En el tubo muestra añadimos: 1 ml de reactivo , 1 gota de R3 y 200 ul de muestra
7.Lo dejamos reposar
8.Lo introducimos en el baño maría durante 5 minutos a 37 grados
9.Leemos los resultados con el espectrofotometro
RESULTADO:
LECTURA DE LOS RESULTADOS
Sideremia (en ug/dl)= A muestra - A blanco de la muestra / A del patrón * concentración del patrón
INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS
Valores normales:

• Mujeres:55-140 ug/dl
• Hombres :70-155 ug/dl

HOJA DE TRABAJO:
1.¿por que tenemos un tubo BR?
Para calcular la absorbancia del contenido frente a agua destilada
2.¿Que muestras no son validas?
Las lipemicas o hemolizadas
3.¿En que unidades se mide la sideremia?
Se mide en ug/dl
RESULTADOS OBTENIDOS:

• A de la muestra:0.600
• A de la BM:0.400
• A del P:0.253
• Concentración del patrón80

Sideremia (en ug/dl)= A muestra - A blanco de la muestra / A del patrón * concentración del patrón
0.600*0.400/0.253*80= 75.88 ug /dl
valoracion de los resultados :
El sujeto estudiado se encuentra en los valores normales