jueves, 15 de enero de 2015

RECUENTO DE PLAQUETAS CON HEMOCITOMETRO 15/1/15

PLAQUETAS
MATERIAL:
Tubo de ensayo
Pipeta diluidora de Thoma
Gasas
Camara de recuento
Cubreobjetos
Microscopio
Placa de petri
Papel de filtro
prepipeta con su goma
REACTIVO:
Liquido del laboratorio spinreact
Agua destilada
MUESTRA:
Sangre venosa
FUNDAMENTO:
Se diluye la sangre con el liquido spinreact para contar las células presentes en algunos de los cuadrados de los reticulocitos
DESARROLLO:
1.Vertemos un 1 ml de liquido de spinreact en un tubo de ensayo
2.Cogemos un 1 ml de sangre con la pipeta de Thoma 
3. Cuando sacamos la pipeta del tubo de ensayo la limpiamos con una gasa
4.Introducimos la pipeta diluidora en el tubo de ensayo del liquido y cogemos hasta 101 ml 
5.Agitamos la pipeta durante 5 minutos,en posición horizontal
6.Desechamos las 5 primeras gotas
7.Cargar la camara de recuento , en una placa de petri en cuyo interior se deposita un trozo de papel de fieltro mojado de agua y lo tapamos con la tapadera
8.Dejamos reposar unos 15 minutos
9.La visualizamos en el microscopio, primero con el objetivo de 10x y despues con el de 40x
10.Por ultimo contamos en numero de plaquetas presentes en un cuadro grande central 
RESULTADOS:


LECTURA DE LOS RESULTADOS
Las plaquetas son corpúsculos redondeados u ovalados de tamaño muy pequeño y muy refrigerantes
  • Muy reducida,se efectúa una dilucion menor de la muestra
  • Muy elevada,se efectúa una dilucion mayor de la muestra
PLT/MM3=P*V*D*1000

PLT=10*740*100*1000=740.000.000plt/mm3

HOJA DE TRABAJO:
1.¿Que tipo de pipeta diluidora se utiliza en el recuento de plaquetas?
La pipeta de Thoma
2.¿Que funciones desempeña el liquido de dilucion empleado?
  • Rompe los hematíes 
  • Evita la agregación de las plaquetas entre si 
  • Facilita la visualización de las plaquetas al hacerlas refrigerentes
3.¿Cuanto liquido de dilucion se necesita para efectuar un ensayo?
1 ml aproximadamente
4.¿Con que se puede preparar una camara humeda?
Con una placa de petri cerrada, en cuyo interior se deposita un papel de fieltro con agua
5.¿Con que objetivo se cuentan las plaquetas?
40x
6.¿Como se aprecian los trombocitos en este recuento?
Se aprecian como corpúsculos redondeados u ovalados , de tamaño muy pequeño y muy refrigerentes

RESULTADOS OBTENIDOS:
  • Numero de plaquetas contadas en un cuadrado grande: 740
  • Numero de plaquetas por mm3 de sangre: 740.000.000plt/mm3
VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS:
El numero de plaquetas obtenido es:
Alto
OBSERVACIONES:
También se puede hacer esta practica con micropipeta :
la proporción seria :1/100(1 de sangre y 100 de liquido)

  • Cogemos 0.005 ml de sangre (que es 5 ul ),se coge con una micropipeta de 5 ul
  • Cogemos 0.495 ml de liquido(que es 495 ul), se coge con una micropipeta de 500 ul



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