RECUENTO DE LEUCOCITOS (WBC) 12/1/15

LEUCOCITOS

MATERIAL:

Pipeta diluidora de thoma (para ver los glóbulos rojos, por lo cual necesitamos la que lleva la bola roja)

Tubo de goma con la boquilla 

Cubreobjetos

Camara de recuento

Microscopio

Para film

Papel

Bolígrafo

REACTIVOS:

Liquido de Turck , que se prepara de la siguiente manera:

• 2 ml de ácido acético glacial(Produce lisis de los eritrocitos sin alterar a los leucocitos)
• 1 ml de violeta de genciana al 1%(Tiene núcleo de los leucocitos para observarse mejor y se puede sustituir por azul de metileno)
• 100 ml de agua destilada

MUESTRA:

Sangre venosa

FUNDAMENTO:

Consiste en la determinación del numero de leucocitos presentes en un volumen determinado de sangre.

DESARROLLO:

1. Del frigorífico sacamos la sangre venosa que esta colocada en una bandeja.

2. Movemos la sangre para arriba y para abajo con cuidado, para que no se junten todas las proteínas y no solo salga leucocitos.

3. Quitamos la pinza que tiene la parte superior de la bolsa.

4. Introducimos la goma de la bolsa de sangre dentro del tubo de ensayo.

5. La bolsa de sangre hay que subirla un poco mas arriba que el tubo de ensayo, cuando ya se vea que esta el volumen que se desea, volvemos a bajar la bolsa de sangre.

6. Antes de sacar el tubo de la sangre, cogemos un papel y lo sacamos con cuidado para no manchar la mesa y lo limpiamos.

7. Volvemos a ponerle la pinza, y meterlo en el frigorífico.

8. Depositamos el tubo de ensayo encima de la mesa de trabajo dentro de la gradilla.
9. Incorporamos la pipeta de Thoma dentro del tubo de ensayo, en donde esta la sangre y vamos cogiendo poco a poco 1 ml de sangre con la ayuda de una prepipeta y una goma de plástico
10. Cuando sacamos la pipeta diluidora del tubo de ensayo lo limpiamos  la punta con una gasa
11. Incorporamos la pipeta en el tubo de ensayo del liquido de hayen y cogemos hasta completar la pipeta ,(101ml)
12.Volvemos hacer el mismo paso anterior, limpiamos la punta de la pipeta
13.Ponemos el dedo abajo,para que no salga el liquido y arriba tenemos que quitar la prepipeta y poner otro dedo para moverlo de 2 a 3 minutos en sentido horizontal
14.Quitamos  el dedo de abajo y desechamos las tres primeras gotas 
15.Mojamos con agua las lineas que lleva la cámara de recuento
16.Ponemos un cubreobjetos en la cámara de recuento(en medio)
17.Depositamos la pipeta diluidora en el extremo del cubre y cuando entre una gota quitamos la pipeta , hacemos en el otro sentido la misma operación
18.Dejamos reposar unos segundo al aire libre
19.Lo visualizamos microscopicamente con el objetivo de 40x(enfocamos el retículo y contamos los leucocitos presentes en los cuadros de las esquinas superiores e inferiores)

RESULTADOS:

LECTURA DE LOS RESULTADOS:
Los azules son los del lado izquierdo y los rosas los del lado derecho

2	5	2	2
1	1	5	2
2	2	7	2
1	9	6	4

2	5	2	2
4	5	3	5
4	3	2	3
4	4	3	3

                                                                                                                                                                   

6	3	2	3
3	1	3	4
6	5	7	1
1	6	4	3

                                                                                                          

4	0	5	1
1	4	3	4
3	1	4	5
6	2	5	3

WBC=L/4*D*10

WBC= 216/4*10*10=5.400leucocitos/mm3 de sangre

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS:

• El indice normal de WBC seria entre 5000 y 11000 leucocitos/mm3 de sangre
• La disminución del WBC se produce en las leucopenias
• El aumento se da en las leucocitosis

HOJA DE TRABAJO:
1.¿Cual es el liquido de dilucion utilizado en el WBC?
El Turck
2.¿Para que sirve el violeta de genciana que contiene el liquido de dilucion?
Para teñir los núcleos de los leucocitos
3.¿Con que objetivo se pueden contar los leucocitos?
Con el de 10x o 40x
4.Si la sangre se diluye a 1/10 y se cuentan 100 leucocitos en 2 cuadrados grandes periferico¿Cual es el WBC obtenido?
WBC=L/4*10*D
WBC=100/4*10*20= 5000LEUCOCITOS/MM3 DE SANGRE

RESULTADOS OBTENIDOS:
Leucocitos contados en los 4 cuadrados grandes periféricos : 216
Factor de dilucion: 10
WBC: 5400

VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS:
El WBC obtenido es:
Normal
OBSERVACIONES:
Se puede hacer de otra manera diferente a la explica arriba, la cual consiste en :

Con una micropipeta :

• Cogemos 0.05 ml de sangre (que es 50 ul) , lo cual tenemos que cojer 50 ul con una micropipeta de 50 ul
• Cogemos 0.45 ml de liquido ( que es 450 ul), lo cual tenemos que cojer 450 ul de liquido con una micropipeta de 500 ul