PRACTICA DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA EN SANGRE 19-1-2015

HEMOGLOBINA

MATERIAL:

Espectofotometro

Cubetas

Pipeta

Micropipeta

4 Tubo de ensayo

Agua destilada

Vaso de precipitado

Papel de filtro

3 tubos de hemolisis

REACTIVOS:

Hemoglobin 50x que esta hecho por: 

1. ferricianuro de potasio 0.60mmol/L
2. Cianuro de potasio 77mmol/L
3. Dihidrogeno fosfato de potasio 2mmol/L

Hemoglobin cal

MUESTRA:

Sangre venosa

FUNDAMENTO:

La hemoglobina es oxidada por la acción del ferrocianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cianmetahemoglobina

La intensidad de color formado es proporcional  a la concentración de hemoglobina presente en la muestra ensayada

DESARROLLO:

1. Se hace el reactivo de trabajo añadiendo el bote de R2 al  frasco de R1 , lo agitamos y ponemos el nombre
2. Preparamos el patrón que esta compuesto por tres fases : 1.añadimos en un tubo de ensayo 250 ul(1 patrón y tarro normal)2.Añadimos en otro tubo de ensayo 250 ul y 250 agua destilada(2 patrón 1/2)a continuación vamos mezclando la muestra con una pipeta pasteur 3.Añadimos en un tubo de ensayo 250 ul y 250 ml de agua y lo mezclamos 4.Cogemos otros dos tubos y añadimos en cada uno de ellos diferente sangre (la primera sangre es cojida del frigorífico y es 0+ y la segunda muestra es sangre de valentin 0+)
3. Cogemos tres tubos de ensayo
4. Los rotulamos (blanco , patrón y muestra)
5. En el tubo blanco añadimos:205 ml de reactivo de trabajo 
6. En el tubo patrón añadimos:2.5 ml de reactivo de trabajo y 10 ul de calibrador
7. En el tubo muestra añadimos:2.5 ml de reactivo de trabajo y 10 ul de muestra
8. Lo dejamos reposar durante 3 minutos
9. Leemos los resultados en el espectrofotometro

RESULTADO:

LECTURA DE LOS RESULTADOS

 Hb = A de la muestra /A patron * 7.5

Hb= 0.800/0.500*7.5= 12

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS
Los valores normales :

• Hombres:14-18 g/dl
• Mujeres:11-16 g/dl
• Niños:10-14 g/dl

HOJA DE TRABAJO:
1.¿En que se basan los métodos de determinación de la hemoglobina?
Se basan en las propiedades fisicoquimicas de la molécula de hemoglobina
2.¿Cual es el método recomendado por el comité internacional para la estandarizacion de la hematologia?
El método colorimetrico de la cianmetahemoglobina por su exactitud y precisión
3.¿De donde procede el 20 de la formula para calcular la concentración?
Procede de la cianmetahemoglobina

RESULTADOS OBTENIDOS:
Los resultados son de una mujer , esta comprendido en los valores normales