PRACTICA PREPARACIÓN DE GOTA GRUESA 10/11/14

GOTA GRUESA

MATERIALES:

Tubo de hemolisis

Pipeta pasteur

2 Cubreobjetos

Metanol

Agua destilada

Gradilla

Sangre

Capilar
Giemsa
Agua destilada
Metanol
Cristalizador
Tubos de soporte
vaso 

REACTIVOS:

Colorante de Giemsa

Agua destilada

Metanol

MUESTRA:

Sangre venosa
FUNDAMENTO:
Para la observación de parásitos palúdicos.En la extensión fina (hematíes infectados y parásitos dentro)y en la gota gruesa(hematíes lisados, parásitos que pueden encontrarse)

DESARROLLO:

1. Del frigorífico sacamos la sangre venosa que esta colocada en una bandeja.

2. Movemos la sangre para arriba y para abajo con cuidado, para que no se junten todas las proteínas y no solo salga leucocitos.

3. Quitamos la pinza que tiene la parte superior de la bolsa.

4. Introducimos la goma de la bolsa de sangre dentro del tubo de ensayo.

5. La bolsa de sangre hay que subirla un poco mas arriba que el tubo de ensayo, cuando ya se vea que esta el volumen que se desea, volvemos a bajar la bolsa de sangre.

6. Antes de sacar el tubo de la sangre, cogemos un papel y lo sacamos con cuidado para no manchar la mesa y lo limpiamos.

7. Volvemos a ponerle la pinza, y meterlo en el frigorífico.

8. Depositamos el tubo de ensayo en la gradilla.

9. Con la ayuda de una lanceta cogemos sangre y depositamos una gota de sangre en el portaobjetos (en el centro).

10. La gota que hemos depositado le hacemos el frotis sanguíneo.

11. Añadimos tres gotas de sangre en forma de triangulo.

12. Las vamos juntando con la esquina de un portaobjetos.

13. Dejamos secar el portaobjetos en forma horizontal.

14. Fijamos la extensión sanguínea fina.

15. Depositamos tres gotas de metanol y la dejamos secar unos minutos.

16. La gota gorda tiene que dejarse secar 24 horas.

17. Al día siguiente, vertemos la solución de Giemsa, durante unos 30-45 minutos.

18. Vertemos agua destilada sobre el cubreobjetos, hasta dejarlo limpio.

19. Dejamos secar la preparación unos segundos en posición vertical.

20. Observamos microscópicamente.

RESULTADOS:
Paludismo:

• Puntos de schuffner y Maurer
• Formas en anillo
• Formas ameboideas
• Conglomerados de merozoitos
• Gametocitos libres en el plasma

RESULTADOS OBTENIDOS:

En la preparación  de gota gruesa: 
Los hematíes están intactos.

VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS:

La extensión debe ser considerada como: 
Valida

EL individuo del que procede la muestra de sangre debe ser considerado como:
No infestado por plasmodium.

HOJA DE TRABAJO:

1.¿Que colorante se utiliza para teñir la preparación de gota gruesa?

El colorante de Giemsa.

2.¿Como están los hematíes en la presencia de gota gruesa?

Son lisados.

3.¿Con que sustancia se fija la preparación de gota gruesa?

Metanol.