PRACTICA:DETERMINACION DEL GRUPO Rh EN TUBO

MATERIAL:

Centrifuga

Tubos de centrifuga

Rotulador

Gradilla

Pipeta pasteur

Vaso de precipitado para residuos
Bata
Guantes

REACTIVOS:

• Suero anti-D
• Albumina bovina al 30%
• Solución salina fisiológica al 0.9%

MUESTRA:

Hematíes problema

FUNDAMENTO:

Ponemos en manifiesto la presencia del antígeno D en la superficie de los hematíes mediante su enfrentamiento a un suero anti-D

DESARROLLO:

1.Lavamos tres veces los hematíes con solución salina fisiológica

2.Tomamos 0.5 ml de sangre problema y la llenamos a un tubo de centrifuga

3.Completamos el tubo con solución salina y agitamos suavemente

4.Centrifugamos durante 4 minutos a 2.000 rpm 

5.Retiramos el sobrenadante y repetimos dos veces mas el proceso

6.Rotulamos dos tubos con las letras D y A

7.En el tubo D añadimos una gota de suero anti-D 

8.En el tubo A ponemos una gota de albumina bovina al 30%

9.A cada tubo le añadimos una gota de suspensión de hematíes al 5%

10.Agitamos los hematíes suavemente

11.Centrifugamos durante 1 minuto a 1.000 rpm o 30 segundos a 3.500 rpm

12.Golpeamos suavemente el fondo de los tubos 

RESULTADO:

LECTURA DE LOS RESULTADOS

• Aglutinación positiva:Si se forman grumos de color rojo en un liquido claro
• Aglutinación negativa:Si se resuspenden homogéneamente los hematíes 

El tubo con albumina es un control negativo,y debe dar siempre ausencia de aglutinación. 

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS

• Si el tubo D presenta aglutinación y el tubo A no decimos que el paciente es Rh positivo
• Si no se produce aglutinación en ninguno de los dos tubos procedemos a incubar ambos a 37 grados durante media hora.Posteriormente centrifugamos a 1000 rpm durante 1 minuto 
• En el caso de persistir negatividad comprobaremos que el paciente no posee un D mediante una prueba de coombs indirecta

HOJA DE TRABAJO:

1.¿Por que utilizamos el control de albumina?

Porque los hematíes revestirse en in vivo de anticuerpos en presencia de producir una agregación que daría la idea de una aglutinación positiva

2.¿Que ocurre si no aparece aglutinación en el tubo D?

Que aparece Coombs indirecta

3.¿Que debemos detectar mediante un Coombs indirecto?

Que el paciente no posee un D 

4.¿Como  se prepara la muestra problema?

• Lavamos tres veces los hematíes con solución salina fisiológica
• Tomamos 0.5 ml de sangre problema y la llenamos a un tubo de centrifuga
• Completamos el tubo con solución salina y agitamos suavemente
• Centrifugamos durante 4 minutos a 2.000 rpm 
• Retiramos el sobrenadante y repetimos dos veces mas el proceso

RESULTADOS OBTENIDOS:

	Aglutinación
Sección S 18
Sección A 2

VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS:

La sangre analizada es:Rh positivo