PRACTICA:DETERMINACION SERICA DEL GRUPO ABO

MATERIAL:

Tubo de centrifuga

Pipeta pasteur

Baño maría

Centrifuga

Reloj

Rotulador

Papel de fieltro

Gradilla
Guantes
Micropipeta
Puntas de micropipeta
Vaso de precipitado 
Vaso de precipitado para residuos
Para film
Bata
Guantes

REACTIVOS:

• Hematíes del grupo A1
• Hematíes del grupo A2
• Hematíes del grupo B
• Hematíes del grupo 0
• Hematíes de la sangre problema

MUESTRA:

Suero

FUNDAMENTO:

El suero de un individuo solo debe contener anticuerpos frente a los antígenos que no están presentes en sus propios hematíes.Por ello,al hacer reaccionar este suero con hematíes conocidos del grupo A y del grupo B,solo producirá aglutinación en el caso de ser enfrentado a eritrocitos con antígenos distintos a los de sus propios hematíes.

Esta técnica puede realizarse tanto en porta como en tubo,aunque se prefiere la determinación en tubo porque la centrifugación de los hematíes intensifica el fenómeno de aglutinación

DESARROLLO:

1.Cogemos un 1 ml de sangre con una micropipeta y echamos una cantidad de suero salino

2.Centrifugamos los tubos a 2.000 rpm durante 4 minutos

3.Retiramos el sobrenadante

4.Repetimos dos veces mas el proceso anterior

5.Añadimos en otros 4 tubos dos gotas de sangre de cada grupo y 5 ml de suero fisiológico

6.Rotulamos un tubo de centrifuga con la letra A1; A2;B;0

7.Añadimos a cada tubo dos gotas de suero problema

8.Depositamos una gota de la suspensión de hematíes que se corresponderá con la letra del tubo rotulado.

9.Agitamos suavemente y centrifugamos a 1000 rpm durante 1 minuto

11.Golpeamos suavemente el extremo inferior de los tubos 

RESULTADO:

LECTURA DE LOS RESULTADOS

• Si aparecen unos grumos rojos flotando en un liquido claro indica que existe aglutinación.
• En el caso contrario, los hematíes se resuspenden homogéneamente dando lugar a un liquido de color rojizo

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS

El grupo eritrocitario que se asignara,atendiendo a los resultados obtenidos,se puede ver en el siguiente cuadro:

Tubo A1	Tubo A2	Tubo B	Tubo 0	Tubo C	ac presentes en el suero	Grupo eritrocitario
-	-	+	-	-	Anti-B	A1
- o +*	-	+	-	-	Anti –B y anti-A	A2
+	+	-	-	-	Anti-A	B
+	+	+	-	-	Anti-A y anti-B	0
-	-	-	-	-	Ninguno	A1B
-o+”	-	-	-	-	Niguno o anti-A1	A2B
+	+	+	+	+	Autoanticuerpos	Initerpretable

+=Aglutinación

-=No aglutinación

*=Este anti-A1 se encuentra solo en un 2% de los individuos A2

0=Este resultado se observa solo en el 25% de los individuos A2B

ES difícil confirmar el grupo sanguíneo por esta técnica en el caso los recién nacidos ,ya que sus anticuerpos no están bien desarrollados aun.También encontramos dificultades en los pacientes con agammaglobulinemia,ya que carecen de anticuerpos y en aquellos que poseen otros anticuerpos específicos o inespecificos capaces de reaccionar con los antígenos del grupo ABO

HOJA DE TRABAJO:

1.¿Que son los hematíes tipados?

Los hematíes tipados suelen ser los grupos A,B y 0

2.¿A que dilucion empleamos los hematíes del paciente?

5%

3.¿Que clase de muestra se emplea en esta técnica?

Suero

4.¿Que ocurre cuando el tubo C presenta aglutinación?

Puede ser: Si esta en suero es anticuerpos y si es del grupo eritrocitario es ininterpetable

RESULTADOS OBTENIDOS:

	Aglutinación	No aglutinación
Tubo A1		-
Tubo A2		-
Tubo B	+
Tubo 0		-
Tubo C		-

VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS:

• Los AC encontrados en el suero son:Anti-B
• El grupo eritrocitario de la sangre amalizada es:AB
• Da lugar al grupo eritrocitario A1  y ac presentes en el suero Anti-B

OBSERVACIONES:

Nos han salido las dos veces negativas , la primera la hemos echo con los hematíes de suspensión de 2.5% , con dos gotas de suero y la segunda vez la hemos echo con 6 gotas de hematíes y 2 de suero y tampoco ha salido aglutinación